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    產(chǎn)品中心您現(xiàn)在的位置:首頁(yè) > 產(chǎn)品展示 > 生化檢測(cè)試劑盒 > 脂肪酸代謝系列 > 肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)測(cè)試盒

    肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)測(cè)試盒

    簡(jiǎn)要描述:

    肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)測(cè)試盒是存在于線粒體內(nèi)膜的一類(lèi)酰基轉(zhuǎn)移酶。可逆地催化從酰基輔酶將酰基轉(zhuǎn)移至L-肉毒堿的反應(yīng),在轉(zhuǎn)運(yùn)脂肪酸通過(guò)線粒體內(nèi)膜的過(guò)程中起重要作用。

    更新時(shí)間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商;覽量:2901

    商品詳情:
    肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)測(cè)試盒正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

    測(cè)定意義:

    肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶是存在于線粒體內(nèi)膜的一類(lèi)酰基轉(zhuǎn)移酶。可逆地催化從酰基輔酶將酰基轉(zhuǎn)移至L-肉毒堿的反應(yīng),在轉(zhuǎn)運(yùn)脂肪酸通過(guò)線粒體內(nèi)膜的過(guò)程中起重要作用。

    貨號(hào)

    規(guī)格

    檢測(cè)方法

    YSH3387

    100管/96樣

    微量法

    YSH3387-1

    50管/48樣

    可見(jiàn)分光光度法

    測(cè)定原理:

    基于肉堿和脂酰輔酶在丙二酰輔酶存在與否的條件下,通過(guò)肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CPT-I)的作用,產(chǎn)生脂酰肉堿,并釋放出巰基輔酶(COA-SH),與Ellman試劑DN-TB反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色的TNB。通過(guò)其吸收峰值得變化(412nm),來(lái)定量分析CPT-1的活性。

    需自備的儀器和用品:

    可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、無(wú)水乙醇和蒸餾水
    樣品中AA提取:

    1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來(lái)水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測(cè)。

    2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

    3.血清等液體:直接檢測(cè)。

    計(jì)算公式如下:

    1、血清(漿)LAP活力的計(jì)算:

    單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

    LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

    2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

    1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:

    單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

    LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

    2)按樣本鮮重計(jì)算:

    單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

    LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

    3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:

    單位的定義:每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

    LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

    V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬(wàn)。

    注意事項(xiàng):

    1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

    2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果測(cè)定的吸光值過(guò)高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

    3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰,因此,570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

    4.檢出限為100μmol/L。

    信號(hào)素3GELISA試劑盒 SEMA3G免費(fèi)代測(cè)試劑

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    肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)測(cè)試盒淀粉比色法檢測(cè)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣

    直鏈淀粉比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

    直鏈淀粉比色法檢測(cè)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣

    支鏈淀粉比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

    支鏈淀粉比色法檢測(cè)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣

    α比色法檢測(cè)試劑盒 微量法 100管/48樣

    α比色法檢測(cè)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣

    β比色法檢測(cè)試劑盒 微量法 100管/48樣

    β比色法檢測(cè)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣


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