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    羥自由基清除能力測試盒

    簡要描述:

    羥自由基清除能力測試盒作用于體內蛋白質、核酸、脂類等生物分子,造成細胞結構和功能受損,進而導致體內代謝紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標之一,在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應用。

    更新時間:2024-09-02;廠商性質:經銷商;覽量:1799

    羥自由基清除能力測試盒

    商品詳情:
    測定意義:

     

    羥自由基作用于體內蛋白質、核酸、脂類等生物分子,造成細胞結構和功能受損,進而導致體內代謝紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標之一,在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應用。

    貨號

    規(guī)格

    檢測方法

    YSH3386

    100管/96樣

    微量法

    YSH3386-1

    50管/48樣

    可見分光光度法

    測定原理:

    H2O2/ Fe2+ 通過Fenton反應產生羥自由基,水楊酸能有效捕捉產生的羥自由基并與其反應生成有色物質2,3-二羥基苯甲酸,在510nm處有最大吸收峰,加入具有清除能力的物質后,有色物質便會減少,從而可以根據吸光值的數值判斷樣品清除羥自由基的能力。

     

    自備實驗用品:

     

    恒溫水浴鍋、酶標儀、96孔板和蒸餾水。
    樣品中AA提取:

    1.按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行室溫勻漿,然后轉移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測。

    2.細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

    3.血清等液體:直接檢測。

    計算公式如下:

    1、血清(漿)LAP活力的計算:

    單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

    LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

    2、組織、細菌或細胞中LAP活力的計算:

    1)按樣本蛋白濃度計算:

    單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

    LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

    2)按樣本鮮重計算:

    單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

    LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

    3)按細菌或細胞密度計算:

    單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

    LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

    V反總:反應體系總體積,2×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;2000:細菌或細胞總數,2000萬。

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    二磷核酮糖羧化酶(Rubisco)測試盒50管/48樣 紫外分光光度法

    二磷核酮糖羧化酶(Rubisco)測試盒25管/24樣 紫外分光光度法

    3磷甘油醛脫氫酶(GAPDH)測試盒100管/96樣 微量法

    3磷甘油醛脫氫酶(GAPDH)測試盒50管/48樣 紫外分光光度法

    3磷甘油醛脫氫酶(GAPDH)測試盒25管/24樣 紫外分光光度法

    果糖1,6二磷酶(FBP)/果糖1,6二磷酯酶測試盒100管/96樣 微量法

    果糖1,6二磷酶(FBP)/果糖1,6二磷酯酶測試盒50管/48樣 紫外分光光度法
    注意事項:

    1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標準品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內使用完畢。

    2. 為保證實驗結果的準確性,需先取1-2個樣做預實驗,如果測定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測定。

    3. 與茚三酮反應在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測定結果不含這兩種氨基酸的量。

    4.檢出限為100μmol/L。


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