很多人在做檢測(cè)的時(shí)候，都不太在意ELISA試劑盒中的說(shuō)明書(shū)上的檢測(cè)步驟，覺(jué)得自己都知道，都懂的。但就是因?yàn)檫@種心態(tài)，所以造成有時(shí)候的檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)失誤。生物檢測(cè)本來(lái)就是個(gè)很?chē)?yán)肅并且嚴(yán)謹(jǐn)?shù)氖虑椋愕囊粋€(gè)小的疏忽可能就會(huì)造成意想不到的錯(cuò)誤。
正確的使用ELISA試劑盒的步驟：
1.在使用之前要將試劑充分的混合均勻，但是要注意在搖晃的時(shí)候不要產(chǎn)生過(guò)多的泡沫，從而造成有太多的空氣進(jìn)入試劑中，產(chǎn)生測(cè)試誤差。
2.根據(jù)要檢測(cè)樣品的數(shù)量來(lái)確定的板條數(shù)。每個(gè)比對(duì)的樣品和空白孔是做復(fù)孔，而樣品的數(shù)量就可以自己視情況而定，不過(guò)能用復(fù)孔的還是用復(fù)孔。將標(biāo)本液體1:1稀釋后倒入50微升的反應(yīng)孔中。ELISA試劑盒
3.在反應(yīng)孔中在加入50微升的待測(cè)樣品，然后馬上加入50微升的生物素標(biāo)記抗體，蓋上模板，輕輕搖晃使其混合均勻后，在37攝氏度的恒溫下等待1小時(shí)。
4.將孔內(nèi)液體甩去，加滿洗滌液，震蕩約30秒后，在甩去洗滌的液體，用紙將水吸干。這樣子重復(fù)三次。再在沒(méi)空加入80微升的親和鏈酶素-HRP，同上混合均勻后，在37攝氏度的恒溫環(huán)境下等待半小時(shí)。
5.同步驟四的洗滌方法。洗滌干凈后，在沒(méi)空中加入底物A,B各50微升，小心混合均勻，避免光照在37攝氏度下等待10分鐘。ELISA試劑盒
6.取出酶標(biāo)板，迅速加入終止液50微升，測(cè)定結(jié)果。在450納米的波長(zhǎng)處檢測(cè)各個(gè)孔的OD值。
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